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| | Nachweis | Kein Nachweis verfügbar |
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| Antibiotika-Biosynthese; Aminoglykoside; sekundär Metabolite; Substrat-unterstützte Katalyse; Substrat-Transfer; Adenylierung; strukturelle Enzymologie; tRNA Modifikation; Methanocaldococcus jannaschii; Enzym-Evolution | |
| antibiotic biosynthesis; aminoglycoside; secondary metabolite; substrate-assisted catalysis; substrate channeling; adenylation; structural enzymology; tRNA modification; Methanocaldococcus jannaschii; enzyme evolution | |
| O-Carbamoyltransferasen (O-CTasen) katalysieren die Carbamoylphosphat-abhängige Carbamoylierung verschiedener Sekundärstoffwechselprodukte wie zum Beispiel Antibiotika. Im Gegensatz zu den bekannten Vertretern der N CTasen benötigen die O CTasen zusätzlich ATP als Co Substrat. Der zugrundeliegende Reaktionsmechanismus wurde anhand der O CTase TobZ welche die Carbamoylierung des Aminoglykosid-Antibiotikums (AGA) Tobramycin durchführt detailliert aufgeklärt. Dabei konnte die Bildung eines carbamoylierten AMP-Intermediates identifiziert werden. Des Weiteren wurde die Akzeptorspezifität von TobZ analysiert und zusätzlich bisher nicht-beschriebene AGA generiert welche anschließend auf deren antibiotischer Wirkung hin untersucht wurden. Als weiteren Vertreter diente die putative O-CTase Mj1051 aus dem methanogenen Archaeon M. jannaschii. Dabei konnte die Röntgenkristallstruktur des Enzyms gelöst werden. Hinweise auf eine RNA-modifizierende Funktion von Mj1051 konnte durch die Co-Renigung von RNA-Molekülen erbracht werden. | |
| O-Carbamoyltransferases (O-CTases) catalyse the carbamoylphosphate-dependent carbamoylation of several secondary metabolites such asantibiotics. In contrast to the well-known enzymes of the N CTase family O-CTases possess an intriguing requirement for ATP as a co-substrate. The underlying reaction mechanism was investigated in detail using the enzyme TobZ responsible for the carbamoylation of the aminoglycoside-antibiotic (AGA) tobramycin. The existence of a carbamoylated AMP molecule as a reaction intermediate was revealed. The acceptor specificity of TobZ was analysed and new AGA were generated and probed for their antibacterial activity. The putative O-CTase Mj1051 derived from the methanogenic archaea M. jannaschii was also studied and its crystal structure solved. Detection of co-purified RNA suggests a role in RNA modification. |
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