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| Nachweis | Kein Nachweis verfügbar |
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Hydrogenase; HybG; HybC; C-terminales Peptid | |
Hydrogenase; HybG; HybC; C-terminal peptide | |
In der vorliegenden Arbeit wurden die wasserstoffoxidierenden und -verbrauchenden Proteine die Hydrogenasen aus Escherichia coli thematisiert. Das Bakterium synthetisiert drei membranständige [NiFe]-Hydrogenasen. Der Fokus der Dissertation lag insbesondere auf der Rolle des C-terminalen Peptids an der großen Untereinheit HybC der Hydrogenase 2. Das C-terminale Peptid von HybCerwies sich dabei als wichtige Kontrollstelle während des Reifungsprozesses der Hydrogenase. Es konnte nachgewiesen werden dass das C-terminale Peptid eine wichtige Funktion für die Konformation des Proteins spielt. Vermutlich hält der C-Terminus die Konformation der großen Untereinheit offen und erleichtert so die Kofaktorinsertion. Nach derProzessierung des C-terminalen Peptids der großen Untereinheit findet die Dimerisierung mit der kleinen Untereinheit statt. Untersuchungen zeigten dass gewisse Abhängigkeiten während der Reifung zwischen großer und kleiner Untereinheit bestehen. | |
Escherichia coli synthesize three membrane bound [NiFe]-hydrogenases consisting of a large α-subunit and a small β-subunit. The maturation of both occurs in parallel. The active site of the large subunit consists of NiFe(CN)2CO-cofactor and is assembled by the hyp-machinery. After finishing insertion of the cofactor the C-terminal peptide of the large subunit is cleaved off by a specific protease. In this research was shown that the C-terminal cleavage signals the correct insertion of the cofactor and leads to a conformational switch of the large subunit. After processing the large subunit forms a dimer with the small subunit and is Tat-dependent transported across the membrane. This project shows that it is possible to dupe the Tat-machinery with a genetically truncated large subunit. This subunit is produced by a stop codon insertion before the C-terminus and mimics the processed cofactor containing large subunit. This variant has no cofactor incorporated forms a dimer with the small subunit and this heterodimer is transported across the membrane by the Tat-machinery. These results underline the importance of the C-terminal peptide in the hydrogenase maturation process. |
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