Titelaufnahme

Titel
Genexpressionsanalysen in elicitierten Suspensionskulturzellen von Escholzia californica Cham. und Identifizierung von EcaERF2 als transkriptioneller Regulator der Alkaloidbiosynthese / von Tobias Kurz
VerfasserKurz, Tobias
BetreuerKutchan, T.M. Prof. Dr. ; Gatz, C. Prof. Dr. ; Roos, W. Prof. Dr.
Erschienen2009 ; Halle, Saale : Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt, 2009
UmfangOnline-Ressource (V, 166 S. = 10,74 mb)
HochschulschriftHalle, Univ., Naturwissenschaftliche Fakultät I, Diss., 2009
Anmerkung
Tag der Verteidigung: 10.11.2009
Sprache der Zusammenfassung: Englisch
SpracheDeutsch
DokumenttypE-Book
SchlagwörterHalle
URNurn:nbn:de:gbv:3:4-1759 
Zugriffsbeschränkung
 Das Dokument ist frei verfügbar.
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Genexpressionsanalysen in elicitierten Suspensionskulturzellen von Escholzia californica Cham. und Identifizierung von EcaERF2 als transkriptioneller Regulator der Alkaloidbiosynthese [10.73 mb]
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Nachweis
Keywords
Eschscholzia californica; Suspensionszellkulturen; Benzophenanthridinalkaloide; Hefeelicitor; EST-Sequenzierung; cDNA-Macroarray; Expressionsanalysen; AP2/ERF-Transkriptionsfaktor; Methyltransferasen; Cytochrom-P450 Enzyme
Keywords (Englisch)
Eschscholzia californica; cell suspension cultures; benzophenanthridine alkaloids; yeast elicitor; EST-sequencing; cDNA macroarray; expression profiling; AP2/ERF transcription factor; methyltransferases; cytochrome P450 enzymes
Keywords
Elicitierte Suspensionszellkulturen von Eschscholzia californica produzieren Benzylisochinolinalkaloide vom Benzophenanthridin-Typ. Die Biosynthese der Benzophenanthridine ist auf enzymatischer Ebene bereits gut untersucht und einige cDNAs aus verschiedenen Spezies konnten insbesondere mit Hilfe von Zellkulturen isoliert werden. Über die Regulation der Alkaloidbiosynthese liegen dagegen erst wenige Erkenntnisse vor. Zur Identifikation von Transkriptionsfaktoren wurden EST-Sequenzierungen und Genexpressionsanalysen mittels cDNA-Macroarrays durchgeführt. Aus einem Set von 1140 Unigenes konnten fünf neue cDNAs der Alkaloidbiosynthese isoliert werden. Davon gehören drei zu Methyltransferasen und zwei zu Cytochrom-P450 Enzymen der CYP719A-Familie. Zudem wurden zahlreiche cDNAs für mögliche Transkriptionsfaktoren gefunden. Durch die vergleichenden Genexpressionsanalysen wurden EcaERF2 und EcaERF3 als potentielle Regulatoren identifiziert. Beide Transkripte zeigten nach Zugabe von Methyljasmonat oder dem Hefeelicitor eine schnelle starke und transiente Induktion die der Transkriptakkumulation der biosynthetischen Enzyme voraus geht. Für EcaERF2 wurde in vitro die spezifische Bindung an die GCC-Box nachgewiesen. Dieses Element befindet sich auch im Promotor des Berberinbrückenenzyms. Diese Daten legen nahe das EcaERF2 ein transkriptioneller Regulator der Alkaloidbiosynthese in E. californica ist. Die Ergebnisse dieser Arbeit liefern Sequenzinformationen zur Auffindung neuer Biosyntheseenzyme sowie Ansätze zur weiteren funktionellen Charakterisierung der Transkriptionsfaktoren EcaERF2 und EcaERF3.