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| Nachweis | Kein Nachweis verfügbar |
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Chlamydomonas reinhardtii; Iso-Pytochelatine; Cadmium; ESI-MS/MS; ICP-MS; UPLC; TCEP; Ferrocen; Phytochelatinsynthetase; γ-Glutamyltranspeptidase | |
Chlamydomonas reinhardtii; iso-pytochelatins; cadmium; ESI-MS/MS; ICP-MS; UPLC; TCEP; ferrocene; phytochelatine synthase; γ-glutamyl transpeptidase | |
Es ist bekannt dass die Grünalge C. reinhardtii in Anwesenheit von Metallionen Phytochelatine (PC) synthetisiert. Obwohl der Hauptanteil des Metalls während der 48 h Exposition mit 70 µM Cd extrazellulär vorlag war die intrazelluläre Konzentration ausreichend um eine signifikante Änderung im Thiolpeptid-Metabolismus hervorzurufen. Massenspektrometrie eröffnet neue Möglichkeiten PC sowohl auf qualitativer als auch auf quantitativer Ebene zu untersuchen. Eine ESI-MS/MS-Methode inklusive der Probenvorbereitung (z.B. Disulfidreduktion) wurde etabliert und führte zur Identifizierung von kanonischen PC und erstmals in C. r. auch Iso-PC. Für die Quantifizierung wurden die PC (a) Ferrocen derivatisiert mittels HPLC-ICP-MS und (b) nativ mittels UPLC-ESI-MS/MS analysiert. Die präzise UPLC-MS-Methode zeigte dass nach 48 h Cd Stress CysPC am höchsten konzentriert sind. Aussagen zur Synthese und physiologischen Funktion der CysPC werden nach in vivo und in silico Experimenten getroffen. |
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