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| Nachweis | Kein Nachweis verfügbar |
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bone morphogenetic protein-2; Pro-Form; rekombinante Herstellung; Renaturierung; inclusion bodies; Internalisierung; Knochenmarker; Alkalische Phosphatase | |
bone morphogenetic protein-2; Pro-Form; recombinant expression; refolding; inclusion bodies; internalization; processing; bone marker; alkaline phosphatase | |
Pro-Formen von Wachstumsfaktoren können die Funktion(en) der reifen Proteine beeinflussen. In dieser Arbeit wurde die Pro-Form von bone morphogenetic protein-2 (proBMP-2) untersucht. Obwohl die Rolle des Propeptids bisher noch nicht aufgeklärt ist gibt es Hinweise auf eine Latenzfunktion. Daher könnte proBMP-2 als therapeutischer Wirkstoff zur Knochenheilung in Frage kommen. Im Rahmen dieser Arbeit wurde proBMP-2 rekombinant in E. coli exprimiert und ein Rückfaltungsprotokoll zur Gewinnung von nativem Protein aus inclusion bodies etabliert. Die biologische Aktivität wurde im Vergleich zu der von BMP-2 auf Ebene von Transkription und Translation knochenspezifischer Markergene/proteine untersucht. Es konnte gezeigt werden dass proBMP-2 im Vergleich zum reifen Wachstumsfaktor eine geringere und zeitverzögerte Wirkung aufweist. Dieses Verhalten konnte durch Untersuchungen zum turn-over von proBMP-2 in Zellkultur erklärt werden. ProBMP-2 wird in die Zellen aufgenommen intrazellulär prozessiert und BMP-2 nachfolgend sezerniert. |
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