Titelaufnahme

Titel
Anreicherung und Charakterisierung von O-Methyltransferasen aus Arabidopsis thaliana / von Lisette Wirsing
VerfasserWirsing, Lisette
BetreuerVogt, Thomas PD Dr. ; Baginsky, Sacha Prof. Dr. ; Piechulla, Birgit Prof. Dr.
Erschienen2012 ; Halle, Saale : Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt, 2012
UmfangOnline-Ressource (XI, 157 S. = 0,49 mb)
HochschulschriftHalle, Univ., Naturwissenschaftliche Fakultät I, Diss., 2012
Anmerkung
Tag der Verteidigung: 19.06.2012
Sprache der Zusammenfassung: Englisch
SpracheDeutsch
DokumenttypE-Book
SchlagwörterHalle
URNurn:nbn:de:gbv:3:4-8491 
Zugriffsbeschränkung
 Das Dokument ist frei verfügbar.
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Anreicherung und Charakterisierung von O-Methyltransferasen aus Arabidopsis thaliana [10.23 mb]
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Nachweis
Keywords
Capture Compound Mass Spectrometry; S-Adenosyl-L-Methionin; Organspezifität; Nitrocatechol; O-Methyltransferasen; Caffeoyl-CoA O-Methyltransferasen; AtCCoAOMT3
Keywords (Englisch)
Capture Compound Mass Spectrometry; S-Adenosyl-L-methionine; organ specificity; nitrocatechol; O-methyltransferases; caffeoyl-CoA O-methyltransferases; AtCCoAOMT3
Keywords
Ziel der Arbeit war die Anreicherung spezifischer Enzymfamilien des pflanzlichen Metabolismus. Mit Hilfe der Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS) war eine Anreicherung und Bestimmung einiger Vertreter der mit S-Adenosyl-L-Methionin bzw. -Homocystein interagierenden Proteine direkt aus Proteinrohextrakten von Arabidopsis thaliana möglich. Im Falle der beispielsweise in jungen Blütenknospen abundanten O-Methyltransferasen (OMTs) AtOMT1 AtCCoAOMT1 und AtTSM1 wurden übereinstimmend mit den bekannten Funktionen die organ- und entwicklungsspezifischen Vorkommen nachgewiesen. Die parallele Entwicklung von Nitrocatechol-Sonden basierte auf Inhibitoren der tierischen Catechol OMTs welche den pflanzlichen kationenabhängigen Caffeoyl-CoA OMTs ähneln. Hier konnte in ersten Anreicherungsexperimenten eine tendenzielle Differenzierung zwischen kationenabhängigen und kationenunabhängigen OMTs gezeigt werden. Weiterhin war ein Vertreter der Caffeoyl-CoA OMTs die AtCCoAOMT3 mittels CCMS kaum in Wurzeln erfassbar. Bestätigend konnten durch qRT-PCR geringe Transkriptmengen nachgewiesen werden. Als potentielle Substrate dieses Proteins sind Phenylpropane denkbar. Zusätzlich zeigte eine T-DNA-Insertionsmutante phenotypisch eine verringerte Keimungsrate unter Salzstress.
Keywords
The aim of this thesis was the enrichment of specific enzymes of the plant metabolism. Capture Compound Mass Spectrometry (CCMS) enabled the enrichment and detection of some members of S-Adenosyl-L-methionine or -homocysteine interacting proteins directly from crude extracts of Arabidopsis thaliana. In case of the three O-methyltransferases (OMTs) AtOMT1 AtCCoAOMT1 and AtTSM1 the organ and developmental specific distribution was proven according to the literature. The simultaneous development of nitrocatechol probes based on inhibitors of the mammalian Catechol OMTs which are similar to the plant cation-dependent caffeoyl-CoA OMT-like proteins. Here first enrichment experiments indicated a tentatively differentiation between cation-dependent and cation-independent OMTs. Furthermore one member of the CCoAOMTs AtCCoAOMT3 was barely detectable in roots by CCMS. Confirmatively a low transcript level was obtained by qRT-PCR. Biochemical analysis revealed phenylpropanoids as potential substrates of this protein. The corresponding T-DNA insertion line showed a reduced germination under salt stress conditions.