Das Gram-negative Bakterium Xanthomonas campestris pv. vesicatoria ist der Erreger der bakteriellen Fleckenkrankheit bei Paprika und Tomate und einer der Modellorganismen zum Studium bakterieller Pflanzenpathogene. Das hrp ("hypersensitive response and pathogenicity")-Gencluster von Xanthomonas campestris pv. vesicatoria kodiert ein Typ III-Sekretionssystem, das die Proteinsekretion in das extrazelluläre Medium sowie die Translokation von Effektorproteinen in die pflanzliche Wirtszelle ermöglicht. Unter den annähernd 20 Proteinen, die in die Typ III-Sekretion involviert sind, sind neun von ihnen zwischen pflanzenpathogenen Bakterien konserviert und bilden wahrscheinlich die Kernkomponente eines funktionellen Sekretionsapparates. Unter Zuhilfenahme eines lexA-basierenden bakteriellen Dihybridsystems wurden die Interaktionen der konservierten Proteine des Sekretionsapparates näher charakterisiert. Hierbei konnten Homo- und Heterodimerisierungen zwischen der ATPase HrcN und dem regulatorischen Protein HrcL gezeigt werden. Auch war es möglich, Interaktionen zwischen den löslichen zytoplasmatischen Domänen der integralen Membranproteine HrcU und HrcV aufzuzeigen. Der Proteinkomplex des Typ III-Sekretionssystems in der inneren bakteriellen Membran wird sehr wahrscheinlich von sechs integralen Membranproteinen aufgebaut, die bis auf HrpD5 homolog zu Komponenten des Flagellumbasalkörpers sind. Mittels des mini-Tn5-Derivates Tnpholac1 wurde die Topologie (also die Anzahl transmembraner Segmente und ihrer Orientierung in der Membran) bestimmt und zu allen sechs Proteinen ein Topologiemodell erstellt. Um genauere Aussagen über die Organisation der Operone hrpD und hrpE von Xcv zu erlangen, wurde der Transkriptionsstart von hrpD5 mittels 5'-RACE bestimmt. Eine His6-Epitop-markierte HrpD5-Variante wurde erstellt und gereinigt, um die N-terminale Sequenz des Proteins zu bestimmen.
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