Titelaufnahme

Titel
Investigation of Calmodulin - Target interactions by mass spectrometry / von Sabine Herbst
VerfasserHerbst, Sabine
BetreuerSinz, Andrea Prof. Dr. ; Sawers, Gary Prof. Dr. ; König, Simone Prof. Dr.
Erschienen2014 ; Halle, Saale : Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt, 2014
UmfangOnline-Ressource (163 Bl. = 10,75 mb)
HochschulschriftHalle, Univ., Naturwissenschaftliche Fakultät I, Diss., 2014
Anmerkung
Tag der Verteidigung: 04.02.2014
Sprache der Zusammenfassung: Deutsch
SpracheEnglisch
DokumenttypE-Book
SchlagwörterHalle
URNurn:nbn:de:gbv:3:4-11522 
Zugriffsbeschränkung
 Das Dokument ist frei verfügbar.
Dateien
Investigation of Calmodulin - Target interactions by mass spectrometry [10.75 mb]
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Nachweis
Keywords
Calmodulin; Munc13; skMLCK; Massenspektrometrie; Chemisches Cross-linking
Keywords (Englisch)
Calmodulin; Munc13; skMLCK; Mass spectrometry; Chemical cross-linking
Keywords
Calmodulin (CaM) ist ein wichtiger Ca2+-Sensor. Zur großen Zahl an CaM-Zielproteinen zählen Munc13 skMLCK AC1 und AC8. In dieser Arbeit wurde die Interaktion zwischen CaM und diesen Proteinen untersucht. Munc13-Proteine sind wichtige präsynaptische Regulatoren. Es konnte gezeigt werden dass kurze Peptide aller Munc13-Isoformen die die minimale CaM-Bindesequenz darstellen mit einem 1-5-8-CaM-Bindemotiv antiparallel an CaM binden. Die CaM/Munc13-Peptidkomplexe zeigen eine geschlossene CaM-Konformation und sind dem CaM/NO-Synthase-Peptidkomplex strukturell ähnlich. Obwohl 2009 eine offenere CaM-Konformation in einer NMR-Struktur mit C-terminal verlängerten Munc13-Peptiden gezeigt wurde konnte diese im CaM/skMLCK-Peptidkomplex trotz C-terminaler Verlängerung und Aminosäureaustauschen des klassischen skMLCK-Peptides nicht gefunden werden. Weiterhin konnten mittels chemischem Cross-linking und Massenspektrometrie die Kenntnisse über die CaM/AC1 bzw. AC8-Interaktion ausgebaut werden.
Keywords
Calmodulin (CaM) is an important Ca2+ sensing protein. Among the high number of target proteins are Munc13 skMLCK AC1 and AC8. In this work the interaction between CaM and all these proteins was studied. Munc13 proteins are important presynaptic regulators. It had been found that short Munc13 peptides of all four Munc13 isoforms representing the minimal CaM-binding sequence bind with a 1-5-8 CaM-binding motif in an antiparallel manner to CaM. The CaM/Munc13 peptide complexes are similar to the CaM/NO synthase peptide complex showing a closed conformation of CaM. Although an extended CaM conformation was observed in an NMR structure with C-terminally elongated Munc13 peptides this extended conformation was not found in the CaM/skMLCK peptide complex after C-terminal elongation and amino acid exchanges of the classical skMLCK peptide. Additionally deeper insights into the CaM/AC1 and AC8 interaction could be gained by chemical cross-linking and mass spectrometry.