Titelaufnahme

Titel
Optimierung von Fermentationsprozessen zur Herstellung rekombinanter, spezifisch und unspezifisch isotopenmarkierter G-Protein-gekoppelter Rezeptoren in Escherichia coli / von Christian Berger
VerfasserBerger, Christian
BetreuerHuster, Daniel Prof. Dr. ; Lilie, Hauke PD Dr. ; Gawrisch, Klaus PD Dr.
Erschienen2010 ; Halle, Saale : Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt, 2010
UmfangOnline-Ressource (152 Bl. = 29,31 mb) : graph. Darst.
HochschulschriftHalle, Univ., Naturwissenschaftliche Fakultät I, Diss., 2010
Anmerkung
Tag der Verteidigung: 06.07.2010
Sprache der Zusammenfassung: Englisch
SpracheDeutsch
DokumenttypE-Book
SchlagwörterHalle
URNurn:nbn:de:gbv:3:4-3334 
Zugriffsbeschränkung
 Das Dokument ist frei verfügbar.
Dateien
Optimierung von Fermentationsprozessen zur Herstellung rekombinanter, spezifisch und unspezifisch isotopenmarkierter G-Protein-gekoppelter Rezeptoren in Escherichia coli [29.31 mb]
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Keywords
G-Protein-gekoppelter Rezeptor; Escherichia coli; Isotopenmarkierung; Minimalmedium; Neuropeptid Y-Rezeptor Typ 2; Cannabinoid-Rezeptor Typ 2
Keywords (Englisch)
G protein-coupled receptor; Escherichia coli; isotopic labeling; minimal media; neuropeptide Y receptor type 2; cannabinoid receptor type 2
Keywords
Aufgrund der Assoziation von G-Protein gekoppelten Rezeptoren mit einer Vielzahl schwerwiegender Krankheiten ist die Charakterisierung dieser Proteine und des Mechanismus der Signaltransduktion für ein gezieltes Design von Pharmazeutika von hohem Interesse. Die Charakterisierung wird jedoch durch geringe Ausbeuten der rekombinanten Expression erschwert. Zudem ist eine strukturelle Analyse von GPCRs mittels NMR-Spektroskopie die eine Untersuchung der flexiblen Strukturen und der Dynamik von Proteinen zulässt mit der Inkorporation stabiler Isotope (15N 13C) verbunden. Die vorliegende Arbeit ermittelte die reproduzierbare optimale Expression isotopenmarkierter GPCRs in inaktiver und funktionaler Form in Escherichia coli. Die maximale Ausbeute des inaktiv exprimierten Neuropeptid Y-Rezeptors Typ 2 lag bei 35 mg/L Medium und die des funktional exprimierten Cannabinoid-Rezeptors Typ 2 bei 2 mg/L Medium mit einer Effizienz der spezifischen und unspezifischen Isotopenmarkierungen von >95%.